显微镜在3D, 4D, 5D和6D。

对活细胞或模式生物进行快速、多维成像的能力在现代生物学研究的许多领域中变得越来越必要。许多基本的生物学现象(包括发育、修复、癌症、细胞周期、信号、运动、细胞内运输和病毒途径)都涉及在3D空间维度上快速移动的微观结构。为了有效地“实时”捕捉这些复杂的、相互作用的过程，我们需要通过所有三个空间维度对细胞进行快速延时成像，即有效的4D成像。

此外，由于我们通常希望跟踪多个细胞内结构的运动和相互作用，这通常需要我们同时或非常快速地在几个光谱分离的荧光团标签(即5D!)的激发和成像之间切换。在所有活细胞或生物体的直接成像研究的基础上，都希望通过最大限度地减少光毒性细胞/组织损伤和合并荧光团的光漂白来尽可能长时间地保存活的主体。可用于5D细胞成像的技术包括自旋盘共聚焦显微镜，反褶积广域和结构照明，所有这些都可以受益于使用电子倍增CCD技术。例如iXon EMCCD相机。

无论是作为Revolution共聚焦活细胞成像系统的关键组件，还是作为“独立”EMCCD + iQ成像软件解决方案，安多的EMCCD技术都是纳入超灵敏4/D显微镜设置的理想检测器。所提供的非凡的信噪比(S/N)明显大于传统点扫描探测器所提供的。此外，由于它是一个快速读取成像设备，EMCCD产生快速帧率，非常适合快速获取z堆栈和延时序列。光谱维度可以通过多个荧光团之间的快速切换来访问，甚至可以同时将发射信号分裂到传感器的不同区域。也有可能执行真正的“光谱成像”覆盖在本目录的其他地方。这在本节的其他地方有介绍。通过最小化激发功率，染料的光漂白率和细胞的光毒性显著降低。iXon3 EMCCD相机和Luca电子倍增CCD成像平台均在多mhz快速读出速度下显示单光子灵敏度和高量子效率(QE)。