使用Neo和Zyla sCMOS相机进行磁泳

图1所示。在列维的实验室里，尼康AZ-100水平放置着，一边是Neo，另一边是定制设计的NdFeB磁铁。

来自利物浦大学综合生物学研究所拉斐尔·利维研究小组的劳拉·博加特对了解磁性纳米颗粒如何与细胞相互作用感兴趣;这对于一系列生物医学应用非常重要，包括疾病诊断、热疗和干细胞追踪应用。bob综合app官网登录这项技术是他们与俄亥俄州立大学的Chalmers教授合作开发的，http://www.chbmeng.ohio-state.edu/people/chalmers.html)利用磁电泳提供细胞内磁性纳米粒子含量的定量。这项技术被用来研究不同的磁性纳米颗粒是如何被包括癌细胞和干细胞在内的各种细胞所吸收的。

首先用DAPI(一种与DNA结合的荧光团，可以看到细胞核)对细胞进行染色，然后将细胞悬浮在甘油溶液中并插入玻璃毛细管中。然后将毛细管放入定制设计的钕铁硼磁铁中，创建一个磁场梯度和细胞荧光成像的使用尼康阿兹- 100已经定制说谎水平而不是垂直(图1)。与磁性纳米颗粒细胞标记走向区域的高磁场的速度成正比的磁细胞内的纳米颗粒，而未标记的细胞将简单地由于重力而沉积。通过在均匀磁场区域内成像细胞，可以产生细胞运动的梯度轨迹(如图2所示)，可以用来推断磁速度。

图2。小鼠肾干细胞的细胞核荧光图像(上)和相应的运动轨迹(下)(a)未标记和(b)用磁性纳米颗粒标记。

磁性纳米颗粒的典型负载范围为100万~ 10亿粒，对应的磁速度范围为1 μm/s ~ 1000 μm/s;范围很广!由于小像素尺寸的大视场和高灵敏度的结合，我们选择了Andor Neo sCMOS相机。鲍嘉博士表示:“我们能够以良好的信噪比对细胞核进行成像，每张图像可以追踪多达1000个细胞。Neo的像素大小很小，这对我们测量缓慢移动的细胞的像素位置的微小差异非常重要。”

博加特博士知道，当Neo被购买时，需要一个高规格的个人电脑，以快速脱机大量数据。她决定自己组装个人电脑，因为这比从任何已知的供应商那里购买定制的电脑要便宜。博加特博士发现，这样做“可以让我们对存储、内存和处理速度等所有单个组件进行‘优化’。”最快的处理器与大量RAM的结合意味着图像采集不受PC的计算速度的限制。”此外，博加特博士还添加了固态硬盘(SSD)，用于在相机和PC之间进行图像脱机，因为SSD比传统硬盘驱动器(HDD)写入信息的速度更快。因此，动力学系列参数不受硬盘写入速度的限制。但由于ssd无法提供与hdd相同的存储容量，Bogart博士在PC上增加了两个1tb的hdd。计算机被安置在一个大的情况下，未来证明它为进一步的hdd如果需要。最后，使用的操作系统是64位的;它允许所有8gb RAM被使用，这是必不可少的，当工作与大量的高帧率动力学系列。 Dr. Bogart built her PC for the Neo sCMOS for £650 (without monitors and DVI cables). Details of the computer specifications can be seen below and in Figure 3.

图3。在个人电脑

计算机规格:主板:Gigabyte GA-Z68X-UD3P-B3 Intel Z6处理器:英特尔core i7-2600K 3.40 GHz储存:硬盘:1tb Seagate Barracuda 7200 12(主存储设备)已售状态硬盘:OCZ 120gb Solid 3 SSD(二级存储设备-用于脱机动力学系列图像)记忆:8gb (2 × 4gb) DDR3 PC3显卡:XFX ATI Radeon HD 5770 PCIe controller card(适用于Andor Neo camera)操作系统:Windows 7(64位)

关于细胞追踪和Raphael Levy实验室的其他研究的更多细节可以在网上找到http://raphazlab.wordpress.com/

Neo和Zyla sCMOS相机是这种“磁泳”技术的理想选择。Neo和Zyla都有550万像素的传感器，在不影响读取噪声或帧率的情况下提供大视场和高分辨率。6.5微米的小像素尺寸确保了足够的点扩展功能的过采样，即使对于低放大倍率的物镜(例如10倍NA 0.3;20 x NA 0.5)。读噪声非常低，即使与性能最高的慢读ccd相比也是如此。Neo的读噪可以达到1e - rms，而Zyla的读噪为1.2e- rms，两者都没有信号放大，同时分别以30和100帧每秒读取550万像素。