iXon系列的一个显著特征是定量捕获和呈现电子或光子单位的数据的能力,转换应用于实时或后转换步骤。
入射到阵列探测器像素上的光子被捕获并转换为电子。在给定的曝光时间内,在每个像素中收集到的电子信号与信号强度成正比。在emccd中,电子中的信号在EM增益寄存器中进一步相乘。从RealGain™刻度中选择软件中的平均倍增系数。
它可以是理想的直接量化信号强度,或按每像素的电子或按每像素的入射光子。然而,在读出过程中,阵列探测器必须首先将电子信号(在emccd中是倍增信号)转换成电压,然后通过模拟到数字转换器(ADC)对其进行数字化。每个模拟到数字单元(ADU)在信号强度标度中被表示为一个“计数”,每个计数对应一个精确的电子数量。此外,计数中的信号值将位于电子偏置偏移值之上。在iXon中,这个“基线”被固定在100次。
因此,为了反算电子中的原始信号,相机必须非常精确地存储电子到ADU的转换因子(这取决于通过软件选择的前置放大器增益)。作为绝对电子的信号的计算还需要偏压偏移和EM增益的知识。计算路径如图1(右)所示。
此外,对每个波长的量子效率(QE)和相机窗口的光吞吐量特性的了解使这一过程更进一步,允许在每个像素上以光子入射估计信号。对于这一步,用户必须输入信号波长。例如,在荧光显微镜中,这将对应于一个与感兴趣的荧光团匹配的窄波段发射滤波器定义的中心波长。如果探测器上的信号的光谱覆盖太宽,以至于QE曲线在这个范围内变化很大,那么入射光子估计的准确性就会受到影响。
iXon的计数转换功能提供了在电子或入射光子中获取数据的灵活性,在显示速率中可以忽略的慢。此外,还可以选择以计数方式记录原始数据,并作为转换后的步骤,将其转换为电子或光子,同时保留原始数据。