如何使用蜻蜓纺丝盘显微镜进行多重原位杂交

细胞生物学中的空间转录组学(或多路复用)揭示了几个(Xⁿ) rna在其2D或3D生物环境中。 多路复用已成为神经科学、肿瘤生物学、疾病靶点诊断、发展、行为研究等领域的热门话题。已经开发了几种技术来实现空间解析转录组学(也称为空间基因组学或多路复用);这样的例子有FISSEQ, instaSEQ, ossmfish, STARmap, MERFISH和seqFISH。

空间转录组学的优势在于它能够传递多个基因产物的空间和序列信息。事实上，直到最近，rna都可以批量测序，或者在单细胞水平上测序，但是组织环境信息(生物学背景)丢失了。然而，了解基因在哪里表达及其周围环境或微环境，可能揭示发育、脑功能、神经退行性疾病和癌症的分子基础。

多路混合实验需要进行几轮混合和检测。这些轮在同一个示例中依次执行。为了能够染色(Xⁿ)分子时，探针必须被移除，样品需要再次杂交，这可以通过将微流体系统附加到蜻蜓纺丝盘共焦系统．

机制上，荧光探针标记杂交RNA分子，获取图像数据(通常是扫描容量蒙太奇)，然后将探针冲洗掉。在每个图像数据集获得后，“剥离和清洗”步骤之后是另一个混合轮。这个过程重复N次，产生大量编码的图像数据。在下面的信息图中，我们解释了获取多路复用成像所需的顺序步骤蜻蜓共焦 。