CRISPR/CAS9技术的最新发展使使用感兴趣的基因使用Xenopus。本课程是考虑到这一点的。我们的目标是让每个学生设计一组专注于其基因或生物学兴趣的实验。在开始课程之前，将期望学生选择感兴趣的基因，教师将生成针对这些基因的SGRNA。这些可以是学生自己的基因，也可以是从讲师提供的银行中选择的。基因靶向实验将与其他操纵（例如组织外植体和移植物和活成像）结合使用，以分析基因的功能。

爪蟾越来越多地用作成像测试床，以研究细胞骨架和细胞内运输在细胞生物学和形态发生环境中的作用。该课程维持储存的mRNA，用于将荧光蛋白靶向特定结构，以研究细胞形状和细胞骨架动力学，但鼓励学生带来或建议其他工具，包括荧光生物传感器，张力传感器等。Xenopus的功率可以在实时杠杆作用。细胞荧光成像与显微外科手术，嫁接和分离的细胞培养结合使用。

在课程中，学生将分析基于CRISPR/CAS9的基因耗竭产生的任何表型，同时学习各种各样的技术Xenopus。在以前的课程中，我们指导学生消融各种基因，并帮助他们为其生物学兴趣设计合适的测定法。最近，学生针对自闭症基因，甲状腺基因和免疫调节剂，其中一些已经导致出版物。涵盖的方法将包括微分注射和分子操作，例如CRISPR/CAS9敲除，反义形态的耗竭，转基因和mRNA过表达。此外，学生可以将这些技术与外植体和移植方法相结合，以简化或测试组织水平的相互作用。其他方法包括原位杂交和蛋白质免疫组织化学以及用于基因比较和功能分析的基本生物信息学技术。还将讨论生化方法，例如蛋白质组学和质谱法和生物力学概念。最后，为了可视化亚细胞和细胞间活性，我们将介绍各种样品制备和成像方法，包括延时，荧光成像，光学相干断层扫描和共聚焦显微镜。这些是由尼康，莉卡，胸部和布鲁克的最先进设备促进的。

由于本课程的量身定制性质，它适合那些新手Xenopus领域以及对新兴技术感兴趣的更高级学生。在这里了解更多。