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显微技术的概述:共焦、宽视野、透射光和反褶积
显微镜是现代生命科学应用程序必不可少的工具。bob综合app官网登录从医学诊断(例如,确定感染的来源,或肿瘤的严重性)食品分析。这样的需求也就不足为奇了在过去的十年中,有繁荣的显微镜技术让研究人员看到超越光的衍射极限和获得更多的见解复杂的过程。然而,易用性和可访问性高端技术都很难找到在一个产品在市场上。
与显微镜的进化系统,显微技术的并行开发。第一个在显微镜技术是基于透射光显微镜。额外的技术非常有价值的现代显微镜化验员宽视野荧光显微镜和共焦显微镜。此外,图像重建和治疗通过光子成像后的重新分配是一个重要的因素获得治疗。因此,反褶积软件已经成为一种必不可少的工具,收购后的图像处理。
图1 -共焦的声音洪亮的人pyriformis成像光学切片和或蜻蜓。253,被俘40 x (1.1 NA)与40µm针孔蜻蜓水目的。由维多利亚燕,你德累斯顿。特别感谢Drs。华莱士马歇尔和文森特Boudreau MBL的生理过程,伍兹霍尔。
在本文中,我们将重点放在显微镜并购和收购后技术的概述,总结和或显微镜系统的解决方案。直接点击下面的按钮导航到每个显微镜主题,找到更多。
1。显微技术的概述
1.1透射光显微镜
在透射光显微镜,光线穿过样品,因此,产生了“透射光显微镜”这个词。
最简单的方法是brightfield。这种技术是有用的图像更厚的组织或组织与组织学染色染料苏木精和伊红染色等提供图像对比度和细节。然而,brightfield不是理想的成像样品薄和清白的。问题是,细胞内的结构不产生足够的对比度来呈现我们的眼睛。出于这个原因,透射光显微镜技术进化的其他技术。
相差显微镜检查使用相位板环光路中产生更高的阶段样品内部的结构差异,转化为更高的对比度图像。相衬是一个伟大的进步在透射光显微镜,让薄无污点的样本的结构被观察到。然而,这种方法的问题是产生明亮的光环(可以隐藏的“光环”阶段)的细节。
另一个透射光显微镜技术,提供高对比度和高分辨率迪拜国际资本。DIC代表微分干涉对比;复杂和昂贵的光学。DIC依赖两个偏光镜的使用:一个放置在光照射到样本之前,和其他样品的发射光。偏振光的光线将结合一个轻微的转变;这种转变将产生DIC的高对比度和高分辨率图像。(了解更多学校和或显微镜,透射光显微镜)。
图2 -染色自由成像斑马鱼开发利用BC43 DPC成像模式。单一领域的图像斑马鱼胚胎图像BC43使用10倍成像目标的视野(84毫米)。活胚胎从穹顶成像阶段(一),直到我们17个小时后受精胚胎(F)。在75% 50% (B)和(C)外包,3 - (D) (E)体节的阶段。斑马鱼胚胎成像10倍的目标。图像的最大强度投影35堆栈、覆盖全面的700µm,和捕获每20分钟14个小时。胚胎孵化在28ºC。图像Marco Campinho大学做阿尔加维和克劳迪娅Florindo,和或技术
透射光显微镜的最新发展DPC -微分相位对比(图1)。和或有进一步发展DPC和实现它在新的台式共焦显微镜BC43(专利申请中)。
DPC作品使用的原则,从模型中提取相位的梯度一双强度与相反的照明角度拍摄的图像。使用数学算法DPC图像,可以有一个量化相位微分相衬显微镜的图像重建方法。(田L . &沃勒L。,2015)。
DPC不需要:
- 具体目标(如相衬的目标),
- 偏振光学(DIC),
- 它可以用于图像双折射标本(田l . et al ., 2014)。
此外,DPC允许常数访问样本在各领域,(不依赖调整角或调整偏光镜)。与迪拜国际资本不同,DPC图像可以通过塑料盘子,这是实际确实经常必不可少的众多生物成像的应用程序。bob综合app官网登录DPC提供高对比度和高分辨率成像即使在无污点的薄样品(1)的电影。
总之,DPC是一个易于使用的便宜,透射光显微镜技术,实现大型照明角度和避免机械扫描的困难。对透射光显微镜,DPC结合最好的相衬和DIC成像技术。因此,DPC是一个很好的“label-free”成像方法与明显的应用程序在活样本成像。bob综合app官网登录
电影1 -哺乳动物细胞分裂的时间流逝成像TC文化塑料盘。24板的哺乳动物细胞表达RFP-Cherry微管蛋白与DPC成像和荧光超过14小时。视频详细通过展示一个位置开始,最后所有24井,细胞维持在37ºC二氧化碳独立媒体。注意,DPC给最佳决议通过组织培养的塑料斑块。
和或的蜻蜓和BC43显微镜系统都有透射光技术可用。新的台式共焦成像BC43,也适合从无缝集成DPC到系统中。请阅读我们的技术文章BC43全面掌握系统及其透射光显微镜技术
1.2宽视野荧光显微镜
宽视野成像的特点是完整的示例和随后的照明检测所有样品的发射光。实际上,在宽视野成像,探测器将捕获获得焦点的光和模糊的光。
宽视野荧光显微镜上面是一个光学显微镜技术,(在透射光显微镜技术),捕获所有的光样本(在聚焦)。然而,宽视野荧光显微镜的基础是荧光的物理现象:
以下步骤可以描述荧光的现象:
- 一个分子(或系统)分子吸收特定波长的光即激发波长。
- 激动的电子会“跳”到更高的能级的原子轨道。
- 激动的电子会回到地上能量状态并释放出光子。
- 发射的光子将有更长的波长比激动人心的光子(更少的能量)。即发射波长
荧光是一种瞬时现象和停止存在一旦激发光关掉。宽视野荧光照明可以通过使用汞和氙气灯泡领导光源,最近,基于激光的宽视野照明。
图3 -图像使用宽视野的哺乳动物细胞形态,使用和或BC43。图像显示的宽视野图像前期细胞会。Image 进一步 deconvolved 采集 和 Maximum 强度 投影 后 的 35 Stacks 7 µ米的范围内。黑暗blue-actin、magenta-mitochondria yellow-microtubules Cyan-DNA。克劳迪娅Florindo形象——和或技术。
汞弧灯是第一个光源用于宽视野荧光显微镜。水星灯泡的一个优点是,激发波长有几个山峰,配合的激发波长的许多常用的荧光团显微镜(313、334、365、405、436、546和579海里)。然而,照明不均匀在整个光谱,很难定量分析样品。此外,红外和近红外荧光染料不兴奋的光源。最后,汞是一种有害物质如果可能最好避免。
的氙弧灯有更均匀的照明在整个可见光谱相比,汞弧灯然而,缺点是较低的照度,以及较低的照明电源在不久的UV /紫外范围内。这使得使用共同的DNA染色染料如DAPI和赫斯特挑战使用此光源的发射是虚弱的。此外,这些照明源(汞和氙弧灯)遭受有限的寿命,降低如果照明开关频繁。
LED光源建立了荧光显微镜成像。led已经进化为一种高效照明光源的寿命周期和持续时间不受影响的打开和关闭系统。近年来LED光源已经成为流行和常见的汞和氙气光源替换一次。
最近和或在其注册共焦系统中,基于激光的宽视野成像。激光宽视野成像提供夏普和精确的照明激发,因此允许激发荧光团的样本。激光宽视野成像可以提供非常低的光照强度控制需要图像高度敏感的样本,以及所需的更高的激光权力高端技术应用,如dSTORM超分辨率显微镜。bob综合app官网登录
电影2 -宽视野成像模式允许多个频道的捕获样本几个小时没有光毒性或光褪色的迹象。一百个时间点,每个时间点每8分钟。我们收购和3通道和15 Z平面。实验进行了10 h。在实验的最后没有光毒性或光褪色的迹象。(红色- Histone2BmCherry,青色-微管蛋白gfp,黄先生——肌动蛋白)。图学分:Ines Baiao-Santos和阿尔瓦罗·塔瓦雷斯和克劳迪娅Florindo——和或技术。
宽视野显微镜也带通滤波器,选择性地允许通过所需的发射波长探测器。在宽视野显微镜,探测器是相机,一般EMCCDs或sCMOS。去显微镜相机——比较相机技术和匹配他们的应用程序bob综合app官网登录概述何时使用不同的成像探测器用于宽视野显微镜系统。
总之,宽视野系统捕获所有样本发出的光和不提供光学切片。出于这个原因,他们不适合图像厚和高度散射样品。然而,当他们捕获所有的光发出样品,宽视野系统是很有用的:
- 高感光样品
- 快的事件
- 薄的样品
- Live-cell成像
适合宽视野成像样品薄低散射样品细菌、酵母、微藻和单层细胞。看电影2和图3为宽视野成像的例子。
和或蜻蜓提供所有的技术选择宽视野成像。从最基本的常规应用程序通过同步双彩色成像,甚至等高端技术bob综合app官网登录选择,需求高激光权力dSTORM超分辨率。
和或BC43是常规的主力研究与应用要求更少的专业显微技术。bob综合app官网登录更要求并不意味着谦虚。与BC43用户可以获得多达4种不同的荧光成像通道,4种不同的意义结构可以与BC43荧光标记和检测到的。
1.3共焦显微镜
宽视野荧光显微法有其局限性可视化和样品厚度大于30µm宽视野显微镜极其困难,几乎是不可能的如果样品厚度大于50µm。宽视野的问题荧光显微镜是失焦生成光捕获检测器和细节丢失。在这些情况下,解决方案是使用某种形式的限制照明光学切片获得焦点的区域。可以通过使用共焦显微镜光学切片。
共焦扫描显微镜照射样品的示例使用一个或多个集中光束和捕获只有获得焦点的光成像的光学部分。有两种不同类型的共焦显微镜,激光扫描共焦显微镜(LSCM)和旋转磁盘共焦显微镜。共焦成像系统提供光学切片样品,但这两种工具背后的技术是完全不同的。
图4。示意图说明照明的模式为点扫描和旋转磁盘显微镜。点扫描共焦显微镜(一)集中的单点激光通过一个小孔(针孔)和整个样本逐点扫描顺序。旋转磁盘共焦显微镜(b)照明样品旋转模式1000年完成同声共焦针孔的照明。
激光扫描共焦显微镜(也叫点扫描共焦显微镜)扫描的示例使用一个小的高强度激光。现货主要是利用目标和横向移动扫描区域扫描样本。从发射光,只有获得焦点的Z部分将通过单一的针孔,创建光学部分(单点)。穿过针孔后,检测到辐射光的图光电倍增管(PMT)。由此产生的图像是一笔单点扫描的扫描区域。
图5 -扁鱼BC43使用共焦成像选项。图像被收购和或台式共焦-公元前43使用多个瓷砖收购和蒙太奇。6块是组成的图像覆盖范围554µm。图像呈现与伊万里瓷器(图片学分Marco Campinho大学做阿尔加维和克劳迪娅Florindo,和或Techonolgy)
限制在激光扫描共焦显微镜包括动态范围的图像和收购收购的速度(因为样本通过点扫描)。pmt的量子效率为45%,这意味着从100年开始兴奋的光子,只有45将转化为电子和检测信号,其余将丢失。由于其缓慢的速度采集和探测器的量子效率较低,激光扫描共焦系统不适合实时成像的应用程序。bob综合app官网登录
重要的是,由于采集速度慢点扫描仪,需要妥协分辨率成像大样本时,它将收购低于奈奎斯特准则的一项决议。此外,即使牺牲分辨率,收购的速度极其缓慢相比,一个优化的多点旋转磁盘系统等和或共焦系统。
提高生产率的一个例子所示(电影3)。一只鸡胚胎1.2毫米的成像获取3频道,220成像飞机和35块。完整的鸡胚胎头部导致23 100图像获得的只有2 h。比较实验中相同的收购设置所做的处理一个点扫描共焦系统,和这张图片15 h被收购。
电影3 -优化多点共焦系统实现光学切片mm在蜱虫组织。1、2-millimetre深度清理鸡胚胎成像与和或蜻蜓2 h。这个视频呈现所有的图像从一个1.2毫米的鸡胚胎获得HH28头阶段。完整的图片23 100张图片花了2小时获得和或蜻蜓和相同的样本图像点扫描仪时花了15 h成像。图像与和或捕捉蜻蜓使用10倍的目标和25µm针孔。23100年的视频结果显微镜图像。荧光共焦图像获取与3个独立通道,35块,每瓦220 Z的飞机。
共焦显微镜,旋转的圆盘也被称为多点共焦显微镜,使用磁盘扫描样本包含多个小孔。针孔磁盘旋转速度高,不到一个完整的磁盘旋转需要提供一个图像。这导致一个系统,可以实现光学切片共焦图像一样快44(和或帧每秒BC43)和400帧每秒(和或蜻蜓)(4)的电影。
和或´s旋转磁盘系统有一个建在一个双透镜系统的平行射线激光主要是通过数组的显微镜头,和显微镜头同步旋转盘的小孔。这种双重系统确保更好的光捕获效率,减少图像中的背景噪音。因此,它减少了激光功率需要达到一个优秀的共焦图像。
电影4 -体内成像小鼠肠道的血流量。图像获取与和或蜻蜓200帧每秒的使用和或sCMOS相机。样品由孝宏博士Kuchimaru。(有望医科大学、日本)。
进一步共焦显微镜采用基于成像探测器旋转的圆盘。相机基本探测器提供量子效率2 x大于倍增管(pmt)的量子效率。实际上,从一个图像得到相同的信号噪声的激光扫描显微镜、需要照明的示例2 x相比更多的激光功率等效系统使用基于成像探测器。注意,增加激光功率样本内照明将导致更多的样本漂白和光毒性。
虽然第一代旋转磁盘共焦显微镜,光学切片,它不允许成像深处细胞和组织自图像会受到针孔相声约30µm深度。然而,和或蜻蜓和和或BC43有优化针孔间距和大小,结果在一个系统,可以实现光学切片深入细胞和组织,到几百纳米,毫米深度。
总的来说有两种类型的共焦系统:
- 激光扫描共焦显微镜(或点扫描仪),和
- 共焦显微镜(或多点共焦)旋转的圆盘。
激光扫描和旋转磁盘共焦提供光学切片增加图像的信号噪声,并允许成像深入细胞和组织相比,宽视野系统。
尽管如此,旋转磁盘系统提供增加的速度和效率,增强的信号噪声,和温和的比点扫描共焦成像系统。由于这些原因,目前旋转磁盘技术成为许多研究者的首选技术。
2。反褶积:提高获得图像的分辨率
当光通过光学元素在任何光学系统(如显微镜),它遭受扭曲。任何一个无限小的点不会出现单点,它会发光的飞机以外的平面将导致图像模糊焦点。这个过程叫卷积和固有光学系统。
在一个复杂的形象,每个点的对象是扭曲的。失真可以使用一个数学计算函数点扩散函数(PSF)。(图6)最终的图像获得PSF的结果应用于对象上的所有点成像。
图6 - 3 d的PSF。图片显示了一个单点的扭曲成像光学系统,点扩散函数(PSF)。
尽管卷积是任何光学系统固有的,宽视野系统相比,生成图像从共焦系统复杂的要少得多。然而,用什么方法获得的图像,总会有卷积生成图像;方法总是会有由于光学畸变在结果图像。失焦的光捕获的系统越多,越复杂的图像。因此,越是失焦光在样例,由此产生的图像模糊。
卷积的数学线性的,值得庆幸的是对象的图像可以恢复,如果反向操作应用卷积——这个过程叫反褶积。简单来说,
“反褶积算法恢复光子“属于”的地方,
交付对象的真实图像的失真引起的光学系统。
反褶积算法迭代工作,提高图像质量。算法提供结果时一个预定义的或一个预定义的阈值的迭代次数达到质量的增加。不幸的是,这种迭代过程很耗时间,需要极端的CPU资源。图片越大(大型生物,长延时等),处理时间越长可以扩展,从几个小时到几天(取决于数据集)。
和或已经实施ClearView-GPUTM在融合和伊万里瓷器我们采集和图像分析软件。ClearView-GPU软件是一个基于GPU的反褶积。和或´sClearView-GPU反褶积结果提供50 x速度比CPU-based方法和高达10倍的速度比其他主要GPU-accelerated包,特别是对于大数据集,即使迭代加速是禁用的。
此外,在这两个蜻蜓和BC43,反褶积可以激活作为成像协议的一部分,加速过程和交付deconvolved形象在收购完成后执行。
从上面的出现有两个问题:
1 -使用宽视野成像的优点和deconvolving是什么形象?
重要的是要记住,一个内在的方面越来越多的S / N共焦图像进行光学切片的丢弃失焦。因此,用共焦显微镜拍摄的图像可能比使用宽视野时需要更多的照明系统。这可能导致更高的漂白和光毒性。高度敏感的样品是一个很好的选择是在宽视野图像形态。由此产生的图像可以恢复使用反褶积(图7)。
因为样品不是很厚,宽视野的形态是理想的执行成像,曝光时间以及用于获取图像的激光功率可以高度降低。
图7 -图像使用宽视野的哺乳动物细胞形态,使用和或BC43。图像显示了宽视野图像,在Deconfolution(左),反褶积后(右)。图像的最大强度投影35栈7嗯范围。黑暗blue-actin、magenta-mitochondria yellow-microtubules Cyan-DNA。克劳迪娅Florindo形象——和或技术
2 -如果与收购宽视野可以使用更少的光和删除与反褶积模糊;那么为什么不总是使用宽视野成像?
正如上面说的,共焦成像和宽视野成像受益于反褶积的图像恢复。用户应该决定的最佳影像学方法获取数据,然后应用反褶积结果图像。图7和图8的好例子。在图7中,哺乳动物细胞Z堆栈图像宽视野的模式受益于反褶积和交付一个优秀的结果。另一方面,在图8中,可以观察到一个厚鱼尾巴在宽视野成像形态然后deconvolved。在这种情况下,很明显,宽视野并不是最理想的成像方法对于此示例。
图8- - - - - -扁鱼图像宽视野模式使用BC43和deconvolved清晰视图基于GPU的反褶积。平的鱼尾巴,收购)宽视野成像形态,和B) deconvolved。宽视野成像形态并不是最好的选择图像厚样本——尽管清晰可见的图像受益于恢复基于GPU的反褶积,原始的鱼太厚宽视野成像的方法。结果可以大大提高如果原始图像获得使用共焦选项。参见图9。图像Marco Campinho大学阿尔加维和克劳迪娅Florindo和或技术。
同一地区的鱼图8也在共焦成像模式,随后deconvolved -图9
图9- - - - - -扁鱼形象在共焦模式使用BC43和deconvolved清晰视图基于GPU的反褶积。平的鱼尾巴,收购)共焦成像形态,和B) deconvolved。共焦成像形态图像更厚的样品是最好的选择,图像的质量进一步加强与反褶积与清晰视图基于GPU的反褶积。图像Marco Campinho大学做阿尔加维和克劳迪娅Florindo,和或技术。
结果呈现在图7、8和9显示了从反褶积中获益,但它可以观察厚样品(> 30µm)旋转磁盘共焦仪器需要删除失焦光和提供一种形象,更好地代表对象。
重要的是,和或共焦:BC43和蜻蜓可以形象数百微米到毫米范围内,并清晰可见反褶积总是增加获得的信号噪声和分辨率图像。
总之,反褶积的过程是光学系统中卷积的扭曲数学纠正。因此,它消除了模糊和雾的原始图像。反褶积,因此,增加信噪比(信噪比)和图像的分辨率。如果一个系统提供了反褶积,然后总是会改善你的图像质量:
“…反褶积方法的应用可以提高图像质量,不顾形象的来源……Deconvolve一切!”
安格斯马克•b . Cannell McMorland,基督教Soeller生物共焦显微镜的手册,第25章
3所示。概述和或显微镜系统的解决方案
和或提供优秀的共焦成像系统适应不同用户的需求和应用程序。bob综合app官网登录我们的专利技术在发展中多点共焦显微镜确保与我们的任何系统,用户将受益于:
- 专利均匀照明(北欧化工)
- 高度敏感的检测(sCMOS和EMCCD和或探测器)
- 超快的共焦成像(共焦速度400 fps)
- 高背景拒绝(图片厚标本100 nm的mm范围)
的BC43是一个高质量的价格点共焦系统。“所有在一个”仪器,简单、紧凑,非常用户友好。BC43成像主力,是理想的多个生命科学应用程序,可以在一个角落里的一个核心设施或实验室的长椅上。bob综合app官网登录了解更多关于BC43。
的蜻蜓是一个高端共焦系统。蜻蜓是一个完整的成像系统适用于绝大多数的生命科学应用程序;bob综合app官网登录从更多的常规应用到高端超高速成像,蜻bob综合app官网登录蜓可以交付。了解更多关于
下面我们介绍两个表,可以帮助你选择最适合的共焦成像需求
1 -显微镜所选择的应用程序
2 -显微镜成像技术的选择
请注意,表显示应用程序最适合不同的产品。bob综合app官网登录然而,每个人都做不同的实验需求,请跟我们说说你的具体要求。
3.1显微镜选择应用程序
应用领域 | 类型的实验 | BC43 | 蜻蜓200 | 蜻蜓500 |
细胞生物学 | 细胞内结构 | |||
细胞周期,细胞分裂 | ||||
微管动力学 | ||||
线粒体成像(固定) | ||||
线粒体成像(生活) | ||||
膜动力学(如:胞质分裂) | ||||
细胞内贩卖 | ||||
纤毛成像(> 50帧/秒) | ||||
泡贩卖 | ||||
染色质重塑 | ||||
发育生物学 | 胚胎早期发育 | |||
肢体的形成 | ||||
组织样本的准备工作 | ||||
石蜡切片 | ||||
整个有机体500µm厚 | ||||
整个有机体500 +µm厚(取决于样本transparancy) | ||||
受精 | ||||
宿植病原体相互作用(病毒、细菌、真菌) | ||||
细胞内贩卖 | ||||
泡贩卖 | ||||
瀑样500µm +厚 | ||||
瀑样厚达500µm +(取决于样品的透明度) | ||||
血液流动的研究 | ||||
癌症生物学 | 大组织切片 | |||
活细胞成像运动和分裂 | ||||
体外细胞入侵 | ||||
瀑样500µm厚 | ||||
瀑样厚达500µm +(取决于样品的透明度) | ||||
免疫学与疾病 | 固定的组织 | |||
大样本500µm厚 | ||||
大样本500µm厚(取决于样品的透明度) | ||||
高速实时成像 | ||||
血液流动 | ||||
微生物学 | 细胞内结构(超分辨率SRRF-Stream) | |||
细胞内结构,分子相互作用(超分辨率dSTORM) | ||||
感染细胞表面动力学——TIRF | ||||
神经科学 | 组织文化(住和固定) | |||
组织切片(住和固定) | ||||
整个大脑成像(500µm厚) | ||||
整个大脑成像500µm +厚(取决于样品的透明度) | ||||
钙成像(波40 fps) | ||||
钙成像(泡芙,火花> 40 fps) | ||||
住膜泡运输 | ||||
单分子实时成像 | ||||
生长锥 | ||||
受体定位&回收 | ||||
生物物理学 | 蛋白质相互作用 | |||
蛋白质膜动力学 | ||||
单一的蛋白质运输 | ||||
Endo和胞外分泌 | ||||
Localization-based超分辨率 | ||||
扩张显微镜1、2 | ||||
多路复用成像,空间转录组解决2、3 | ||||
多路成像,空间解决蛋白质组学2、3 |
注:
- 取决于激光功率通过样本的深度图像。
- 取决于吞吐量要求。BC43只有一个相机,不捕捉蜻蜓一样快。
- 公元前43仅限于4激光线。空间转录组通常需要5行。
3.2显微镜成像技术的选择
技术 | 技术 | BC43 | 蜻蜓200 | 蜻蜓500 |
透射光显微镜 | 微分相位对比(DPC) | ✘ | ✘ | ✘ |
相衬 | ✘ | ✔ | ✔ | |
微分干涉对比(DIC) | ✘ | ✔ | ✔ | |
宽视野成像 | 4通道 | ✔ | ✔ | ✔ |
超过4频道 | ✘ | ✔ | ✔ | |
同时双摄像头采集 | ✘ | ✔ | ✔ | |
共焦成像 | 一个针孔大小 | ✔ | ✔ | ✔ |
双针孔大小 | ✘ | ✔ | ✔ | |
同时双摄像头采集 | ✘ | ✔ | ✔ | |
4通道 | ✔ | ✔ | ✔ | |
超过4频道 | ✘ | ✔ | ✔ | |
共焦成像< 500µm *厚 | ✔ | ✔ | ✔ | |
共焦成像> 500µm *厚 | O | ✔ | ✔ | |
专业显微镜的应用bob综合app官网登录 | TIRF | ✘ | ✘ | ✔ |
dSTORM | ✘ | ✘ | ✔ | |
3 d-storm | ✘ | ✘ | ✔ | |
成像节点 | 二维成像 | ✔ | ✔ | ✔ |
三维成像 | ✔ | ✔ | ✔ | |
3 d瓷砖成像 | ✔ | ✔ | ✔ | |
反褶积 | ✔ | ✔ | ✔ | |
多井 | ✔ | ✔ | ✔ | |
缝合 | ✔ | ✔ | ✔ | |
三维缝合 | ✔ | ✔ | ✔ | |
探测器技术 | sCMOS | ✔ | ✔ | ✔ |
EMCCD | ✘ | ✔ | ✔ | |
其他规范 | 近红外光谱780 nm激发 | ✘ | ✔ | ✔ |
台式仪器 | ✔ | ✘ | ✘ | |
温度控制 | ✔ | ✔ | ✔ | |
多档位 | ✔ | ✔ | ✔ | |
时间流逝成像 | ✔ | ✔ | ✔ |
关键:✔——可能,O -是有可能的,✘——不可能的
参考书目
- Lei田、王个和劳拉·沃勒”三维微分相差显微镜检查计算使用LED阵列照明”,选择列托人。39,1326 - 1329(2014)
- l .田和l·沃勒”定量微分相衬成像在LED阵列显微镜”,选择快递。23日,11394 - 11403(2015)
- 布朗M。,(2017),十二个原因你的下一个共焦应该蜻蜓。
- 和或,”ClearView-GPU™反褶积,把这些光子他们是从哪里来的”
- Florindo C (2021),引入BC43 -新的和或共焦